骨肉瘤是最常見的原發(fā)性惡性骨腫瘤,多好發(fā)于青少年。過去40年里骨肉瘤一線治療依然以手術(shù)聯(lián)合化療為主,該方案可以治愈50-70%的初治非轉(zhuǎn)移患者。然而,在表現(xiàn)出化療耐藥或伴發(fā)轉(zhuǎn)移性疾病的患者中,這一比例不足20%[1,2]。因此,亟需開發(fā)一種臨床患者分層方法,準確評估化療預(yù)后并采取針對性措施,進而有效延長患者生存期。
合作開展科研攻關(guān),基于允英自主研發(fā)的先進AllNGS?技術(shù)與人工智能算法平臺,首次發(fā)現(xiàn)并報告了中國骨肉瘤患者中MSH2與FAT1基因上兩個SNV位點能夠精準預(yù)測化療預(yù)后[3]。相關(guān)論文發(fā)表于SCI雜志Journal of Bone and Mineral Research(IF=6.741,一區(qū)TOP期刊),通訊作者為上海市第六人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科,允英醫(yī)療擔(dān)任共同通訊作者。在此特別鳴謝美國MD Anderson癌癥中心Chia-Chin Wu、Guocan Wang及Jianhua Zhang教授、溫州醫(yī)科大學(xué)吳金雨教授為本研究所提供的指導(dǎo)。
本研究入組了110例骨肉瘤患者,并按照患者是否實現(xiàn)五年無病生存(Disease-free survival,DFS)分為預(yù)后好組(28例)與預(yù)后差組(82例)。
選用允英公司AllNGS Panel-315實體瘤分子管家套餐,完成入組患者體內(nèi)腫瘤發(fā)生及發(fā)展相關(guān)的總計315個基因的全部外顯子與部分內(nèi)含子區(qū)段測序。測序數(shù)據(jù)經(jīng)嚴格質(zhì)控與比對注釋后,發(fā)現(xiàn)不同隊列里突變分布特征并不一致,其中有16個基因突變僅存在于預(yù)后好組中,而另有35個基因突變只分布于預(yù)后差組中。借助于機器學(xué)習(xí)隨機森林(Random forest,RF)算法與支持向量機(Support Vector Machine,SVM)算法,本研究對所有檢測到的點突變(Single nucleotide variants,SNV)進行了篩選與建模,發(fā)現(xiàn)位于29個基因上的總計40個SNVs可以區(qū)分骨肉瘤患者化療預(yù)后。
值得注意的是,我們在炎黃中國人基因頻率數(shù)據(jù)庫(Chinese Millionome Database,CMDB)中將這40個SNVs的頻率與骨肉瘤患者進行了對比,證實其中21個SNVs的頻率與健康人群存在顯著性差異(P<0.05),提示這些SNVs可能與骨肉瘤發(fā)生風(fēng)險高度相關(guān)。
進一步地,本研究濾除了40個SNVs中的全部同義突變,只保留位于15個基因上的17個非同義SNVs。有趣的是,患者攜帶這17個非同義SNVs的數(shù)量與患者化療預(yù)后顯著相關(guān)(P<0.05,OR=0.799),尤其是攜帶FAT1或MSH2基因上兩個SNV位點的患者,相比于非攜帶者而言更易于獲得良好的化療預(yù)后。
為了驗證這一結(jié)論,我們后續(xù)又新募集了一個總共包含26名骨肉瘤患者的驗證隊列(8例預(yù)后好,18例預(yù)后差),并證實了攜帶這兩個非同義SNVs將對化療預(yù)后提供有益貢獻。
此外,本研究通過生物信息學(xué)分析調(diào)查了上述FAT1與MSH2兩個基因之間的關(guān)系,并構(gòu)建了調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。我們首次發(fā)現(xiàn),中國人群中存在MSH2-TP53-FAT1這一調(diào)控軸,可能對骨肉瘤患者的化療藥物響應(yīng)具有重要意義。
綜上,本研究首次報道了兩個對中國骨肉瘤患者化療預(yù)后具有重要意義的生物標志物,同時分析了其背后可能存在的潛在的分子機制。研究成果拓展了骨肉瘤的伴隨診斷與精準分子醫(yī)療領(lǐng)域,并為指導(dǎo)骨肉瘤患者化療后生存預(yù)測及臨床分層治療提供了重要參考與理論依據(jù)。
參考資料:[1]. Strauss SJ, Frezza AM, Abecassis N, et al. Bone sarcomas: ESMO-EURACAN-GENTURIS-ERN PaedCan Clinical Practice Guideline for diagnosis, treatment and follow-up. Annals of oncology : official journal of the European Society for Medical Oncology. 2021;32(12):1520-1536. doi:10.1016/j.annonc.2021.08.1995
[2]. Gill J, Gorlick R. Advancing therapy for osteosarcoma. Nature reviews Clinical oncology. 2021;18(10):609-624. doi:10.1038/s41571-021-00519-8
[3]. Zhou C, Sun Y, Gong Z, et al. FAT1 and MSH2 are predictive prognostic markers for Chinese osteosarcoma patients following chemotherapeutic treatment. J Bone Miner Res. Mar 13 2022;doi:10.1002/jbmr.4545